可见分光光度计操作规程

更新时间：2010-09-08 点击次数：9500

一、开机
开机前将样品室内的干燥剂取出，确认电源是否连接。打开仪器电源开关，等待仪器自检通过，自检过程中禁止打开样品室。
二、使用
仪器自检结束后（7个自检项目均出现OK字样），按[MAIN MENU]键（主菜单），屏幕显示如下5个功能项： 1. Phtometry（定量运算）；2.Wavelength Scan（波长扫描模式）；3.Time Scan（时间曲线扫描）；4.System（系统校正）；5.Data display（光度直接测量模式）。按相应选项前的数字键，即可进入该选项的下一级子菜单。
1. Phtometry（定量运算）
1）按[MAIN MENU]键，再按数字[1]键进入Phtometry子菜单下，选中对应的数字来选择所需的测定方式：①%T/ABS（透过率/吸光度测定模式）；②Ratio（比例测定模式）；③Concentration （浓度测定模式或标准曲线模式）；
2）按数字[1]键进入%T/ABS（透过率/吸光度测定）子菜单，选中对应的数字键来设定测定条件：①NUM WL（设定测试波长的数目，zui多可设定6个不同波长）；②WL Setting（设定测试波长具体数值）③Data Mode（选择测定吸光度或透光率），设定完毕后点击[Enter]键确定，所有项目设定完毕后按数字[0] 键确定，等待仪器调整至准备状态，此时屏幕上出现AUTOZERO，将盛有空白溶液的比色皿放入样品室中，按[Start/Stop] 键进行零点的自动调整，自动调零完成后，将样品置于光路中，再按[Start/Stop] 键进行测量，仪器的显示屏自动给出对应波长的数值。
3）按数字[3]键进入③Concentration （浓度测定模式或标准曲线模式），选中对应的数字来设定条件（波长数目，波长数值，标准溶液数目及浓度），设定完毕后点击[Enter]键确定，所有项目设定完毕后按数字[0]键确定，等待仪器调整至准备状态，此时屏幕上出现AUTOZERO，将盛有空白溶液的比色皿放入样品室中，按[Start/Stop] 键进行零点的自动调整，自动调零完成后，将标准溶液置于光路中，按照浓度从低到高顺序依次按[Start/Stop] 键进行测量，测量完毕后仪器将自动给出标准曲线，标准曲线下方有三项供选择：①Process（更改标准曲线的坐标和观察浓度回归曲线的数据）；②Measure（直接进入样品的测量）；③Print（打印浓度回归曲线谱图和数据），选中对应的数字就可执行相应的功能。
4）如果希望返回上一级菜单，按[CLEAR RETURN] 键返回，返回主菜单直接按[MAIN MENU]键。
2. Wavelength Scan（波长扫描模式）
1）参数修改：按[MAIN MENU]键，再按数字[2]键进入②Wavelength Scan（波长扫描模式）子菜单下，选中对应的数字来选择所需修改的内容，修改扫描的起始波长，测量模式，图谱坐标的上下限，扫描速度等等。修改完毕按数字[0]键确定。
2）波长扫描：分别将两个比色皿装上空白溶液和样品溶液，放入比色槽中，按[Start/Stop]键进行谱图扫描（如想终止扫描再次按按[Start/Stop]键），待仪器自动进行基线校正，提示拉入样品自动测试，测试完毕后有扫描图谱出现，下方有相应的数据处理选项①Process②Baseline③Print；
3）数据处理：按数字[1]键进入①Process（数据处理），可以读峰谷值，修改坐标，显示所有数据，求一阶倒数等等功能。
3.Time Scan（时间曲线扫描）
同上（二）操作。
4.System（系统校正）
一般不做。
5.Data display（光度直接测量模式）
同上（二）操作。
三、关机
将比色皿中的溶液倒尽，然后用蒸馏水或有机溶剂冲洗比色皿至干净；关电源将干燥剂放入样品室内，盖上防尘罩，做好使用登记，得到管理老师认可方可离开。
注意事项：
1.开机前将样品室内的干燥剂取出，仪器自检过程中禁止打开样品室盖。
2.比色皿内溶液以皿高的2/3～4/5为宜，不可过满以防液体溢出腐蚀仪器。测定时应保持比色皿清洁，池壁上液滴应用擦镜纸擦干，切勿用手捏透光面。测定紫外波长时，需选用石英比色皿。

3.测定时，禁止将试剂或液体物质放在仪器的表面上，如有溶液溢出或其它原因将样品槽弄脏，要尽可能及时清理干净。
   4.实验结束后将比色皿中的溶液倒尽，然后用蒸馏水或有机溶剂冲洗比色皿至干净，倒立晾干。关电源将干燥剂放入样品室内，盖上防尘罩，做好使用登记，得到管理老师认可方可离开。
问题处理：
   1、如果仪器不能初始化，关机重启；如不成功，请向管理老师反映。
   2、如果吸收值异常，依次检查：波长设置是否正确（重新调整波长，并重新调零）、测量时是否调零（如被误操作，重新调零）、比色皿是否用错（测定紫外波段时，要用石英比色皿）、样品准备是否有误（如有误，重新准备样品）。

气相色谱使用注意事项
一、进样应注意问题：
手不要拿注射器的针头和有样品部位、不要有气泡（吸样时要慢、快速排出再慢吸，反复几次，10ul注射器金属针头部分体积0.6ul，有气泡也看不到，多吸1-2ul把注射器针尖朝上气泡上走到顶部再推动针杆排除气泡，（指10ul注射器，带芯子注射器平感觉）进样速度要快（但不易特快），每次进样保持相同速度，针尖到汽化室中部开始注射样品。
二、安装色谱柱：
1. 安装拆卸色谱柱必须在常温下。
2. 填充柱有卡套密封和垫片密封，卡套分三种，金属卡套，塑料卡套，石墨卡套，安装时不易拧的太紧。垫片式密封每次按装色谱柱都要换新的垫片（岛津色谱是垫片密封）。
3. 色谱柱两头是否用玻璃棉塞好。防止玻璃棉和填料被载气吹到检测器中。
4. 毛细管色谱柱安装插入的长度要根据仪器的说明书而定，不同的色谱汽化室结构不同，所以插进的长度也不同。需要说明的如果你用毛细管色谱柱采用不分流，汽化室采用填充柱接口这时与汽化室连接毛细管柱不能探进太多，略超出卡套即可。
三、氢气和空气的比例对FID检测器的影响：
氢气和空气的比例应1：10，当氢气比例过大时FID检测器的灵敏度急剧下降，在使用色谱时别的条件不变的情况下，灵敏度下降要检查一下氢气和空气流速。氢气和空气有一种气体不足点火时发出“砰”的一声，随后就灭火，一般当你点火电着就灭，再点还着随后又灭是氢气量不足。
四、使用TCD检测器：
1. 氢气做载气时尾气一定要排到室外。
2. 氮气做载气桥流不能设大，比用氢气时要小的多。
3.没通载气不能给桥流，桥流要在仪器温度稳定后开始做样前在给。
五、如何判断FID检测器是否点着火：
不同的仪器判断方法不同，有基流显示的看基流大小，没有基流显示的用带抛光面的扳手凑近检测器出口，观察其表面有无水汽凝结。
六、如何判断进样口密封垫是否该换：
进样时感觉特别容易，用TCD检测器不进样时记录仪上有规则小峰出现，说明密封垫漏气该更换。更换密封垫不要拧的太紧，一般更换时都是在常温，温度升高后会更紧，密封垫拧的太紧会造成进样困难，常常会把注射器针头弄弯。
七、如何选择合适的密封垫：
密封垫分一般密封垫和耐高温密封垫，汽化室温度超过300℃时用耐高温密封垫，耐高温密封垫的一面有一层膜，使用时带膜的面朝下。
八、怎样防止进样针不弯：
很多做色谱分析工作的新手常常会把注射器的针头和注射器杆弄弯，原因是： 1.进样口拧的太紧，室温下拧的太紧当汽化室温度升高时硅胶密封垫膨胀后会更紧，这时注射器很难扎进去。 2.位置找不好针扎在进样口金属部位。 3.注射器杆弯是进样时用力太猛，进口色谱带一个进样器架，用进样器架进样就不会把注射器杆弄弯。 4.因为注射器内壁有污染，注射时将针杆推弯。注射器用一段时间就会发现针管内靠近顶部有一小段黑的东西，这时吸样注射感到吃力。清洗方法将针杆拔出，注入一点水，将针杆插到有污染的位置反复推拉，一次不行再注入水直到将污染物弄掉，这时你会看到注射器内的水变的浑浊，将针杆拔出用滤纸擦一下，再用酒精洗几次。分析的样品为溶剂溶解的固体样时，进完样要及时用溶剂洗注射器。 5.进样时一定要稳重，急于求快会把注射器弄弯的，只要你进样熟练了自然就快了